基质细胞衍生因子-1α交联层粘连蛋白诱导神经干细胞体外迁移与分化
【出 处】:
【作 者】:
张建起
李晓红
张赛
梅金平
杨琴
张娟
武警后勤学院附属医院心内科
天津300162
【摘 要】目的探讨基质细胞衍生因子-1α(SDF-1α)交联层粘连蛋白(LN)在神经干细胞(NSCs)体外迁移及分化中的作用。方法原代提取、培养孕14d胎鼠NSCs,并进行免疫荧光鉴定。选取第3代培养的NSCs,分为多聚赖氨酸(PLL)组、PLL+SDF-1α组、LN组及LN+SDF-1α组。PLL组和LN组NSCs分别接种于含0.1mg/mLPLL和1mg/mLLN包被的培养板上;PLL+SDF-1α组和LN+SDF-1α组分别于接种后置于1mg/L含SDF-1α的培养基培养。采用Transwell细胞迁移试验检测SDF-1α交联LN对NSCs迁移的影响;采用免疫荧光染色检测NSCs的分化情况。结果成功分离并培养原代NSCs,3~5d即有NSCs克隆球形成,细胞具备典型的NSCs形态,且NSCs特异性抗原巢蛋白呈阳性表达。与PLL组相比,PLL+SDF-1α组NSC迁移数量无明显变化(个:3.00±0.99比2.30±0.67,P〉0.05);而与LN组比较,LN+SDF-1α组NSCs迁移数量明显增多(个:85.33±9.61比31.67±5.86,P〈0.05)。免疫荧光染色显示,PLL组和PLL+SDF-1α组仅有极少量NSCs分化的神经元前体细胞,分化率几乎为0。LN组可见部分神经元前体细胞,分化率为(12.50±2.56)%;而SDF-1α交联LN后。神经元前体细胞明显增多,分化率为(21.40±3.41)%,明显高于LN组(P〈0.05)。结论SDF-1α交联细胞外基质中的LN能显著并协同增强NSCs的迁移和分化。
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