流感病毒性肺炎小鼠自然杀伤细胞毒性相关信号转导通路差异基因表达及两种不同治法中药方剂的调控作用研究
【出 处】:
流感病毒性肺炎
疏风宣肺方
解表清里方
自然杀伤细胞
基因芯片
小鼠
【作 者】:
卢娜娜
[1] ;
刘琪
[3] ;
顾立刚
[1] ;
周旭澎
[1] ;
吴珺
[1] ;
邱泽计
[1] ;
张洪春
[2] ;
晁恩祥
[2] ;
张沂
[1]
【摘 要】目的观察疏风宣肺方和解表清里方对流感病毒性肺炎小鼠自然杀伤细胞(NK细胞)毒性相关信号转导通路差异基因表达的调控作用。方法将90只ICR小鼠按随机数字表法分为对照(N)组、模型(M)组、奥司他韦(C)组以及中药疏风宣肺方高、中、低剂量(SH、SM、SL)组和解表清里方高、中、低剂量(JH、JM、JL)组,每组10只。采用流感病毒亚甲型鼠肺适应株FM1滴鼻感染方法制备流感病毒性肺炎模型;N组以0.05m1等渗盐水滴鼻。于制模后2h,C组给予奥司他韦11.375mg·kg-1·d-1灌胃;SH、SM、SL组给予疏风宣肺方(主要药物金银花、连翘、板蓝根等)3.76、1.88、0.94g.kg-1·d-1灌胃;JH、JM、JL组给予解表清里方(主要药物麻黄、石膏、生甘草等)4.36、2.18、1.09g·kg-1.d-1灌胃;N组及M组则灌胃等量生理盐水;各组均0.2mud,连用4d。提取肺组织总RNA,采用基因芯片筛选出NK细胞毒性信号转导通路相关的差异表达基因,以I表示信号强度;并采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)和蛋白质免疫印迹试验(Weslernblotting)对部分基因进行验证。结果在NK细胞毒性相关信号转导通路中,M组较N组上调差异基因43个。用药治疗后,SM组下调差异表达基因36个,JM组下调差异表达基因29个,SL组下调差异表达基因22个,JH组下调差异表达基因21个,SH组下调差异表达基因20个,儿组下调差异表达基因10个;SH、SL、JH、JM、JI组表达下调的基因均包括在SM组的表达谱中,表明中剂量疏风宣肺方调控NK细胞毒性作用最显著。荧光定量PCR和Westernblotting测定结果显示,与M组比较,疏风宣肺方与解表清里方各剂量组对肿瘤坏死因子-α(TNF—α)的mRNA及蛋白表达均有显著抑制作用,疏风宣肺方和解表清里方均以中剂量组最低(TNF—αmRNA:1.07±0.19、1.19±0.14比3.20±0.56,均P〈0�
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