Notch信号和血管内皮生长因子基因对大鼠骨髓间充质干细胞诱导分化后内皮细胞功能的影响
【出 处】:
Notch信号
血管内皮生长因子
骨髓间充质干细胞
内皮细胞
【作 者】:
晋金兰
[1] ;
庄汉屏
[3] ;
韦建瑞
[2] ;
邓哲彤
[1] ;
张敏
[1] ;
张锐
[1]
【摘 要】目的探讨Notch信号和血管内皮生长因子(VEGF165)基因对大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)诱导分化后内皮细胞功能的影响。方法分离、培养大鼠MSCs,用含VEGF165和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)的细胞培养液培养大鼠MSCs2周诱导其向内皮细胞分化;用脂质体将携带有VEGF165基因的质粒转染诱导内皮细胞并对转染效果进行鉴定,逆转录-聚合酶链反应(RT—PCR)检测转染前后细胞上Notch信号受体Notch1和配体Jagged1的表达变化;用γ-内分泌酶抑制剂L-685458阻断细胞Notch信号通路的转导,划痕实验检测细胞迁移能力;将细胞接种在半固体培养基上,观察其形成毛细血管样结构的能力。结果转染VEGF165基因的内皮细胞上表达有VEGF165mRNA,说明实验成功地将VEGF165基因导入诱导后内皮细胞中。转染VEGF,65基因后,细胞上Notch信号配体JaggedlmRNA表达增强(1.08±0.01比1.01±0.02。P〈0.01),NotchlmRNA表达无明显变化(0.60±0.02比0.59±0.01,P〉0.05);细胞的迁移能力增强(划痕空白处细胞个数:46.45±4.46比41.61±1.42,P〈0.05),形成毛细血管样结构能力无明显变化(细胞分级:3.00±0.89比2.00±0.89,P〉0.05)。内皮细胞转染VEGF165基因后,以γ-内分泌酶抑制剂L-685458阻断细胞Notch信号通路的转导,则细胞迁移能力(划痕空白处细胞个数:51.72±3.47比46.45±4.46)和形成毛细血管样结构能力(细胞分级:4.17±0.75比3.00±0.89)均进-步增强(均P〈0.05)。结论转染VEGF165基因可增强大鼠MSCs诱导分化内皮细胞的功能,在此基础上阻断Notch信号通路转导可进-步增强细胞功能。
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