丹参酮ⅡA磺酸钠对海水浸泡人肺上皮A549细胞水通道蛋白5的影响
【出 处】:
海水淹溺
肺损伤
丹参酮ⅡA
人肺上皮细胞
水通道蛋白5
【作 者】:
李佳欢
[1] ;
许敏
[2] ;
范启新
[1] ;
谢晓燕
[1] ;
张勇
[1] ;
赵澎涛
[2] ;
张博
[2] ;
李志超
[2] ;
金发光
[1]
【摘 要】目的 探讨水通道蛋白5(AQP5)在海水浸泡致细胞损伤中的变化,同时了解丹参酮Ⅱ A可能的作用机制.方法 体外传代培养肺腺癌细胞株A549细胞,接种于培养皿中,按不同海水含量分为空白对照组及15%、25%、50%、75%、100%海水组;以25%海水浸泡不同时间分为空白对照组及海水1、4、8 h组;按给予不同剂量丹参酮ⅡA干预分为空白对照组、25%海水组及25、50、75、100μg/ml丹参酮ⅡA干预4 h组.用蛋白质免疫印迹法(Western blotting)检测AQP5蛋白表达;用免疫组化法检测AQP5阳性表达.结果 Western blotting结果显示,25%与50%海水组8 h时A549细胞AQP5蛋白表达均较空白对照组明显增高(1.053±0.231、1.116±0.316比0.101±0.081,均P<0.05);海水1 h组AQP5表达较空白对照组稍有增加(0.306±0.125比0.288±0.098,P>0.05),4 h组(1.423±0.377)明显增加(P<0.01),8 h组AQP5表达(1.507±0.461)较4 h组略有增加,但差异无统计学意义;25μg/ml与50 μg/ml丹参酮Ⅱ A组4 h时AQP5蛋白表达较25%海水组明显减少(0.580±0.186、0.499±0.172比1.013±0.287,均P<0.05).免疫组化显示,25%海水4 h组AQP5阳性表达较空白对照组明显增多(7.21±0.78比0.41±0.07,P<0.01),染色变深;25μg/ml丹参酮ⅡA干预4 h组AQP5阳性表达(3.02±0.23)较25%海水4 h组明显减少(P<0.05).结论 丹参酮Ⅱ A在25μg/ml浓度时毒副作用最小,对海水浸泡A549细胞的保护作用最佳,其机制可能与抑制AQP5的过度表达有关.
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