组蛋白去乙酰化酶抑制剂对内毒素所致血管内皮细胞损伤的影响
【出 处】:
Toll样受体4
组蛋白去乙酰化酶
曲古抑霉素
内毒素
血管内皮细胞
【作 者】:
何慧敏
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李昂
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张淑文
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段美丽
【摘 要】目的探讨组蛋白去乙酰化酶(HDAC)抑制剂(HDACI)对内毒素所致血管内皮细胞损伤的影响,为临床脓毒症相关血管内皮细胞损伤后的保护提供实验依据。方法体外培养血管内皮细胞特性的EAhy926细胞株。采用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测不同剂量脂多糖(LPS,50、100、500、1000ng/ml)对血管内皮细胞的增殖作用。选择细胞存活率较高的LPS剂量,加入100μg/mlHDACI曲古抑霉素(TSA),采用蛋白质免疫印迹法(Western blotting)检测LPS刺激内皮细胞3、6、9、12、24h时细胞内Toll样受体4(TLR4)和HDAC2的蛋白表达。结果与空白对照组比较,100ng/mlLPS刺激内皮细胞9、12、24h后,TLR4蛋白表达明显上调(1.01±0.14、1.25±0.16、1.20±0.19比0.34±0.05,均P〈0.01);刺激12h、24h时HDAC2蛋白表达有所上调(1.14±0.10、1.20±0.04比0.17±0.02,均P〈0.01)。与LPS组相比,TSA组刺激12h时TLR4蛋白表达明显下调(0.37±0.07比1.25±0.16,P〈0.05),24h时TLR4蛋白表达无明显差异(0.37±0.10比1.20土0.19,P〉0.05);TSA组各时间点HDAC2蛋白表达下调,未见条带显现。结论LPS刺激血管内皮细胞后可上调内皮细胞TLR4及HDAC2的蛋白表达;而TSA可以下调LPS刺激内皮细胞后的TLR4表达。
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