胆绿素通过抗凋亡发挥对离体肺缺血/再灌注损伤的保护作用
【出 处】:
【作 者】:
孙洁芸
张鹏
杨欣颖
许迪
杜斌
陈俊良
邬敏辰
庞庆丰
江南大学无锡医学院
江苏无锡214000
【摘 要】目的观察胆绿素(BV)对离体肺缺血/再灌注损伤(LIRI)的保护作用,探讨BV在治疗LIRI中的机制。方法将32只雄性SD大鼠按随机数字表法分为对照组、LIRI组、还原型谷胱甘肽(GSH)组和BV治疗组,每组8只。采用离体肺灌流系统建立大鼠LIRI模型。灌流平衡15min后,对照组继续灌流90min;LIRI组、GSH组和BV治疗组停止灌流1h后复灌90min,后两组灌流液中分别加入4mmol/LGSH和10μmol/LBV。灌流过程中观察离体潮气量(VT)、肺静态顺应性(Cst)、动脉血氧分压(PaO2)、气道阻力(Raw)等肺功能指标。灌流结束后检测肺湿/干重比值(W/D);光镜下观察肺组织病理学改变;采用原位末端缺刻标记试验(TUNEL)观察肺组织细胞凋亡情况,计算凋亡指数;采用蛋白质免疫印迹试验(Western Blot)检测肺组织血红素加氧酶-1(HO-1)、磷酸化c—Jun氨基末端激酶(p-JNK)及天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶3(caspase-3)的蛋白表达。结果与对照组相比,LIRI组于再灌注30min起VT、Cst和PaO2即明显降低,Raw明显升高;LIRI组肺组织出现了不同程度充血水肿、炎性细胞浸润,支气管内皮损伤,W/D比值亦明显高于对照组(8.98±2.34比5.89±0.52,P〈0.05);TUNEL检测显示,LIRI组棕黄色凋亡细胞数较对照组明显增多,凋亡指数明显高于对照组[(13.88±2.35)%比(2.26±0.60)%,P〈0.05];肺组织HO-1、p-JNK、caspase-3蛋白表达水平均明显高于对照组[HO-1(灰度值):0.55±0.13比0.16±0.02,P—JNK(灰度值):0.46±0.08比0.16±0.05,caspase-3(灰度值):0.65±0.13比0.26±0.03,均P〈0.05]。与LIRI组相比,BV治疗组各项肺功能指标均明显改善,肺损伤程度明显减轻,且W/D比值明显降低(6.39±0.45比8.98±2.34,P〈0.05),细胞凋亡指数明显降低[(4.49±1.10)%比�
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