MCC950能减轻线粒体损伤相关分子模式对 肺泡巨噬细胞的致炎效应
【出 处】:
【作 者】:
彭菲菲
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曾振国
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邵强
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赵宁
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江榕
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钱克俭
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刘芬
【摘 要】
目的:观察一种化学合成小分子物质MCC950对线粒体损伤相关分子模式(MTDs)诱导肺泡巨噬细胞炎症反应的影响,并分析其可能的机制。方法利用差速离心法提取SD大鼠肝脏组织来源的MTDs。体外培养大鼠肺泡巨噬细胞NR8383细胞株,并分为空白对照组、LPS阳性对照组(1mg/LLPS刺激12h)、MTDs组(50、100、200mg/LMTDs刺激12h)、MCC950组(0.1μmol/LMCC950处理30min)、MCC950+MTDs组(终浓度0.001、0.01、0.1、1.0μmol/LMCC950预处理30min+100mg/LMTDs刺激12h)5组。收集各组细胞上清液及细胞,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL-1β、IL-18)含量;采用蛋白质免疫印迹试验(WesternBlot)检测细胞中天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶1及其前体(caspase-1、pro-caspase-1)、IL-1β及其前体(pro-IL-1β)的蛋白表达。结果①与空白对照组相比,50、100、200mg/L的MTDs刺激组细胞上清液中TNF-α、IL-1β、IL-18含量均显著升高〔TNF-α(ng/L):459.17±66.71、968.27±124.29、1128.6±172.02比34.67±11.66,IL-1β(ng/L):341.57±38.09、685.00±75.36、784.97±89.28比26.33±8.04,IL-18(ng/L):175.87±37.43、364.23±39.24、370.60±44.55比73.77±12.10,均P<0.05〕,且呈剂量依赖性;并与LPS组具有类似的致炎作用。②与MTDs组相比,0.01、0.1及1.0μmol/LMCC950+MTDs组细胞上清液中IL-1β、IL-18含量显著降低〔IL-1β(ng/L):334.23±33.56、38.67±12.89、36.13±17.69比724.00±77.45,IL-18(ng/L):165.77±25.47、71.37±5.99、66.80±14.61比412.23±40.15均P<0.05〕,其中0.1μmol/L为产生抗炎作用的最佳有效浓度。而各浓度MCC950对TNF-α影响不大。③与MTDs组相比,0.01μmol/LMCC950+MTDs组细胞中caspase-1及IL-1β蛋白表达显著下降(A值:14753.29±950.31比19222.50±1234.13,9981.06±673.63比12759.26±574.69,均P<0.05),pro-caspase-1及pro-IL-1β蛋白表达无�
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