氢气对雪旺细胞多聚二磷酸腺苷核糖聚合酶-1依赖性细胞死亡的调控作用
【出 处】:
【作 者】:
于洋
[1] ;
焦洋
[1] ;
李波
[2] ;
马小叶
[1] ;
杨涛
[1] ;
谢克亮
[1] ;
于泳浩
[1]
【摘 要】
目的:探讨氢气(H2)对高糖诱导大鼠雪旺细胞多聚二磷酸腺苷核糖聚合酶-1(PARP-1)依赖性细胞死亡(PARthanatos)的抑制作用,并探讨其机制。方法将原代培养的大鼠雪旺细胞按随机数字表法分为空白对照组(C组)、H2对照组(H2组)、高渗对照组(M组)、高糖处理组(HG组)、H2治疗组(HG+H2组)5组。H2组和HG+H2组用饱和富氢培养基(含H20.6mmol/L)培养,3个对照组用低糖DMEM培养基(总含糖量5.6mmol/L)培养。HG组和HG+H2组加入44.4mmol/L葡萄糖(培养基总含糖量50mmol/L)培养,C组和H2组加等量生理盐水,M组加等量甘露醇。各组相应处理48h后计算乳酸脱氢酶(LDH)释放率以反映细胞毒性,用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定亚硝酸基阴离子(ONOO-)和8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)含量以反映氧化应激损伤和DNA损伤,用蛋白质免疫印迹试验(WesternBlot)检测多聚二磷酸腺苷核糖(PAR)的蛋白表达,用免疫荧光法检测凋亡诱导因子(AIF)的核转位。结果与C组相比,HG组和HG+H2组细胞毒性明显增加〔LDH释放率:(61.40±2.89)%、(42.80±2.32)%比(9.92±0.38)%,均P<0.01〕,细胞内ONOO-和8-OHdG含量明显增加〔ONOO-(ng/L):853.58±51.00、553.11±38.66比113.56±14.22,8-OHdG(ng/L):1177.37±60.97、732.06±54.29比419.67±28.77,均P<0.01〕,PAR蛋白表达明显增加(积分A值:0.603±0.028、0.441±0.010比0.324±0.021,均P<0.01);而HG+H2组细胞毒性、ONOO^-和8-OHdG含量、PAR表达均较HG组明显降低(均P<0.01)。H2组及M组各项指标与C组比较差异均无统计学意义。免疫荧光显示,C组、H2组和M组AIF均表达在细胞质中;HG组AIF则在整个细胞中表达,且细胞核中表达尤为明显;HG+H2组细胞核中有少量AIF表达。说明高糖可以刺激AIF的核转移,而H2可以抑制这一过程。结论高糖处理大鼠雪旺细胞可以�
相关热词搜索: 糖尿病周围神经病变 雪旺细胞 氢气 多聚二磷酸腺苷核糖聚合酶-1 PARthanatos Diabetic peripheral neuropathy Schwann cell Hydrogen Poly (ADP-ribose) polymerase-1 PARthanatos