【出 处】： 中毒,百草枯 p120连环蛋白 内皮通透性 芒果苷

【作 者】： 何庆 [1] ; 艾娇 [2] ; 黄煜 [1]

【摘 要】目的 探讨百草枯中毒导致的内皮屏障功能障碍与p120连环蛋白（p120-ctn）的关系,以及芒果苷对p120-ctn的调节作用.方法 采用二室弥散模型培养人脐静脉内皮细胞（HUVEC）,并分为对照组（给予含10％胎牛血清的DMEM培养液）、百草枯组（给予终浓度为0.05 μmol/L的百草枯培养液）和芒果苷干预组（百草枯培养基孵育30 min后加入终浓度为20 μmol/L的芒果苷继续孵育）.各组分别培养6、12、24、48、72 h后测定细胞通透性;采用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）及蛋白质免疫印迹试验（Western Blot）测定p120-ctn异构体p120-ctn 1A、p120-ctn 3A的mRNA表达及p120-ctn蛋白表达;采用免疫荧光分析并镜下观察p120-ctn的分布.结果 与对照组比较,百草枯组和芒果苷组细胞通透性均随时间延长呈增加趋势,于72 h达峰值[（29.86±3.98）％、（24.39±2.79）％比（11.71±1.67）％,均P＜ 0.05];而芒果苷组各时间点细胞通透性均显著低于百草枯组（均P＜0.05）.百草枯处理6 h p120-ctn 1A、p120-ctn 3A的mRNA表达（灰度值）及p120-ctn蛋白表达（灰度值）即较对照组明显降低（p120-ctn 1A mRNA：0.150±0.024比0.433±0.024,p120-ctn 3A mRNA：0.316±0.043比0.701±0.020,p120-ctn蛋白：0.485±0.031比0.763±0.038,均P＜0.01）;而芒果苷组p120-ctn 1A、p120-ctn 3A的mRNA表达及p120-ctn蛋白表达于干预6h即较百草枯组明显增加（p120-ctn 1AmRNA：0.281 ±0.021比0.150±0.024,p120-ctn 3A mRNA：0.602±0.042比0.316±0.043,p120-ctn蛋白：0.675±0.031比0.485±0.031,均P＜0.01）,并均随时间延长呈增加趋势,于72 h达峰值（p120-ctn 1A mRNA：1.376±0.128比0.150±0.024,p120-ctn 3A mRNA：1.251±0.059比0.316±0.043,p120-ctn蛋白：0.844±0.050比0.485±0.031,均P＜0.01）.荧光显微镜下观察,对照组p120-ctn主要分布在胞膜上,胞质内略有表达,胞核无表达;百草枯组随时间延长,细胞膜上p120-ctn表达逐渐减少,胞质和核内表达增多,细胞膜�