【出 处】： 微小RNA-146a 肺泡巨噬细胞 肿瘤坏死因子-α

【作 者】： 刘芬 ; 曾振国 ; 聂成 ; 丁成志 ; 邵强 ; 卿城 ; 钱克俭

【摘 要】目的观察转染微小RNA-146a（miR-146a）对大鼠肺泡巨噬细胞炎症因子肿瘤坏死因子-α（TNF-α）表达的影响，探讨转染miR-146a对肺泡巨噬细胞炎症反应的调控作用。方法体外培养大鼠肺泡巨噬细胞株NR8383，分别以25、50、100nmol／LCy^TM3 标记的Pre-miR^TM阴性对照转染细胞，选择转染效率最高的浓度作为实验浓度。将NR8383细胞分成两组，转染组转染50nmol／LPre-miRTMmiR-146a前体，对照组转染50nmol／LCyr^TM3标记的Pre-miRTM阴性对照，采用实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应（RT-qPCR）检测转染后细胞内miR-146a的mRNA表达。用脂多糖（LPs）lmg／L刺激细胞6h后，采用酶联免疫吸附试验（EusA）测定细胞培养上清液内TNF-α蛋白表达，采用RT-qPCR检测细胞内TNF-αmRNA表达。结果以50nmol／LCy^TMm3标记的Pre-miRTM阴性对照转染细胞效率最高，约为80％。与对照组（作为1）相比，转染组细胞内miR-146a的mRNA表达上调了（24．55±6．14）倍（P〈0．01）。LPS刺激后，转染组细胞上清液TNF-α蛋白含量（ng／L）较对照组明显下降（211．5±30．4比616．6±423，P〈0．01），细胞内TNF-αmRNA表达下调了（47±6）％（P〈0．05）。结论转染miR-146a能下调肺泡巨噬细胞炎症因子TNF-α的表达，表明miR-146a能抑制LPS诱导肺泡巨噬细胞的炎症反应。