机械牵张对人肺上皮细胞转分化的影响
【出 处】:
机械牵张
上皮间质转化
急性呼吸窘迫综合征
肺上皮细胞
【作 者】:
张容
[1] ;
毛璞
[2] ;
傅威
[1] ;
庞晓清
[1] ;
王银燕
[1] ;
杨淳
[1] ;
何为群
[1] ;
刘晓青
[1] ;
黎毅敏
[1]
【摘 要】目的 研究周期性机械牵张刺激对人肺上皮细胞BEAS-2B向间质转分化的影响.方法 应用FX-5000T细胞牵张加载系统对BEAS-2B细胞以0.33 Hz频率分别施加10%或20%牵张应力24、48和72 h,相差显微镜下观察细胞形态变化;应用免疫荧光双标染色和实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)分别检测牵张前后E-钙黏蛋白(E-cadherin)、细胞角蛋白-8(CK-8)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和波形蛋白(Vimentin)的蛋白及mRNA表达情况.结果 ①20%病理牵张48 h后,BEAS-2B细胞开始由鹅卵圆形变为长梭形,牵张72 h细胞间隙明显增宽,细胞长梭形改变更明显.10%生理牵张下细胞形态无明显改变.②免疫荧光双标染色结果显示,20%牵张72 h时CK-8蛋白表达明显下调,E-cadherin表达明显下调,α-SMA蛋白表达明显增强.③与未牵张对照组(作为1)相比,20%牵张组E-cadherin mRNA表达在牵张48 h和72 h分别下调至0.388±0.056和0.247±0.064(均P<0.05),CK-8 mRNA表达在牵张72 h下调至0.436 ±0.060 (P<0.01),α-SMA mRNA表达在牵张48 h和72 h分别上调至1.437±0.267和1.261±0.247(均P<0.05),VimentinmRNA表达在牵张48 h上调至1.679±0.172(P<0.05).10%牵张组E-cadherin mRNA表达在牵张72 h下调至0.387±0.081(P<0.05),Vimentin mRNA表达在牵张48 h上调至1.688±0.179(P<0.05);其余各指标变化不明显,差异无统计学意义.结论 持续过度牵张能诱导人肺上皮细胞BEAS-2B发生上皮向间质转分化.
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