泛素在多器官功能障碍综合征小鼠脾脏中表达变化及其对树突细胞免疫调节作用的影响
【出 处】:
多器官功能障碍综合征
泛素
脾脏
树突细胞
主要组织相容性复合物Ⅱ
【作 者】:
曲冰杰
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陆江阳
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刘茜
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王宏伟
【摘 要】目的探讨多器官功能障碍综合征(MODS)脾脏中泛素(ub)的表达变化及意义,研究泛素化主要组织相容性复合物Ⅱ(MHCⅡ)对树突细胞(DC)活性及免疫调节作用的影响。方法210只雄性C57BL/6小鼠按随机数字表法分为正常对照组(30只)和MODS组(180只),通过腹腔注射酵母多糖悬液复制MODS模型,MODS组再随机均分为6、12、24、48h和5~7d、10~12d组。采用免疫组化和免疫荧光法分别检测脾脏中Ub蛋白及CD11c+DC细胞和MHCII类分子I—Ab的表达;荧光定量逆转录-聚合酶链反应(RT—PCR)检测脾脏内UbmRNA表达。结果①免疫组化显示:与正常对照组比较,MODS组伤后6h脾脏Ub阳性细胞逐渐增多,24h达高峰[(16.83±0.38)%比(8.60±0.86)%,P〈0.05],后逐渐下降,至10—12dUb阳性细胞已显著低于正常对照组[(4.664-0.34)%比(8.60±0.86)%,P〈0.05]。②荧光定量RT—PCR显示:与正常对照组比较,MODS组伤后6hUbmRNA表达增强,至24h达高峰(2.17±0.20比1.00±0.00,P〈0.01),随后逐渐下降,至10~12d表达已显著低于正常对照组(0.72±0.08比1.00±0.00,P〈0.05)。③免疫荧光标记显示:与正常对照组比较,MODS组伤后6hCD11c+DC细胞明显增加,至24h达高峰[(7.55±0.04)%比(2.08±0.13)%,P〈0.05],随后明显减少,至10—12d已接近正常对照组[(2.284-0.06)%比(2.08±0.13)%,P〉0.05]。MODS组伤后6hI-Ab阳性细胞明显增加[(10.90±1.40)%比(5.78±0.47)%,P〈0.01],24h表达明显下降[(3.32±0.91)%比(5.784-0.47)%,P〈0.05],48h、5~7d恢复至正常对照组水平后,10—12d再次显著降低[(2.20±0.97)%比(5.78±0.47)%,P〈0.05]。Ub阳性细胞数与I—AbCD11c均呈显著正相关(n=0.899,r2=0.987,均P〈0.05)。结论Ub可能通过泛素化
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